RamosRA.1人B淋巴細胞瘤細胞
含量:>1x106 個/mL, 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長特性:懸浮生長
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
RamosRA.1人B淋巴細胞瘤細胞
發(fā)貨方式:
復蘇后發(fā)貨:我們復蘇細胞后發(fā)貨,貨期一周左右,免運費。(氣溫較好建議復蘇后發(fā)貨)
凍存發(fā)貨(干冰運輸):需額外增加干冰運費,選擇干冰運輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細胞,為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。(氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨)
細胞發(fā)貨采取專業(yè)的運輸包裝,并選擇最快捷的運輸方式(順豐速運或其他空運快遞)
細胞處理方法:
一、貼壁細胞
1、 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,到50ml離心管中,剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代,如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細胞,對50ml上清進行離心收集細胞,如果細胞連片狀態(tài),棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養(yǎng)。
二、懸浮細胞
1、接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養(yǎng)基,重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于 37℃,5%CO2 培養(yǎng)(大部分細胞)。