AGS人胃癌細(xì)胞
含量:>1x106 個/mL
污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640(Gibco 31800-022)+10%FBS
生長特性:貼壁生長
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
AGS人胃癌細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決;2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決;3)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度;4)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細(xì)胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
A431細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:半貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Y79細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:懸??;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H1703細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:3—1:6傳代,每周換液2—3次
L- cell細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞;細(xì)胞傳代方法:1:4-1:10傳代;2-3天換液1次。
HSAS2細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CaSki細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H1792[H1792]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
JK(Jurkat)細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
3T3swiss細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Calu-6細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;細(xì)胞傳代方法:消化20分鐘。1:2。5-6天長滿。
LTEP-P細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
RPTEC/TERT1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H929細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:懸浮生長 ;細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:保持細(xì)胞密度在5×105—1×106 cells/ml之間,每周換液2—3次
NCI-H838細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。
FaDu細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
U266[U266B1]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
D283med細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Pt-K2(PtK2)細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CAL-148細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H498細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:半貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
COLO394[COLO394]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SHG44細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NHEK細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
PK-15細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H1755[H1755]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
PIG1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Hs578bst細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長?。患?xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
CaSki細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
LS 174T細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H295R[H295R]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SHEE細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CHL-1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;細(xì)胞傳代方法:1:6—1:10傳代
PE/CA-PJ34(Clone 12)細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
Sall BclxL 50RFP細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:懸浮生長;細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
D407細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長??;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
RIN-m細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SW948[SW-948]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
GRC-1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Hce-8693細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H838細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。
JeKo-1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:懸??;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HPDLF細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HTMC細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維母細(xì)胞樣;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
NCI-H1648細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代
PC-3M-1E8細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H2330[H2330]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MEG-01細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:懸?。患?xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
USMC細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H1385[H1385]細(xì)胞系保種中心;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。