產(chǎn)品名稱HPT-8細胞,人滋養(yǎng)層上皮細胞?
1.細胞形態(tài)觀察。細胞膜是每天必須觀察的,看是否清晰,細胞的死亡往往是從細胞膜的破裂開始的,早期的表現(xiàn)就是細胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
2.細胞往往會有“抱團”現(xiàn)象,抱團生長或死亡,個人認為應該勤換液或傳代,盡量避 免細胞抱團。
3.細胞生長迅速,強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng),用小瓶養(yǎng)的話,換液不及時,很容易死 亡。細胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代,并且一般為一傳三,或一傳四。
4.培養(yǎng)液:1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培養(yǎng)液,1L一般加碳酸氫鈉2g,并加雙抗,胎牛血清濃度*為12%,zui低不低于10%,有些細胞對胎牛血清高度依賴,比如WRO細胞,HT-22細胞,HA-VSMC細胞,NK-92細胞等。培養(yǎng)液PH應調(diào)為7.20-7.40之間。
5.防污染。L-02細胞生長迅速,較少發(fā)生污染,但常規(guī)措施應該做好。比如無菌操作,酒精 消毒等,培養(yǎng)瓶口建議過火,包括瓶蓋,應過火4秒左右。
6.凍存。-20一小時,-80次夜,液氮長期保存。強烈建議液氮長期保存,盡量不要在-80長期 保存,死亡率很高。
7.復蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃,并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液,使培養(yǎng)液溫度與室溫一 致。1分鐘內(nèi)融化細胞(禁止搖晃凍存管),移取至試管內(nèi),動作要輕,從試管管底開始慢慢上提 移液管,使細胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻,離心,洗2次。
產(chǎn)品名稱HPT-8細胞,人滋養(yǎng)層上皮細胞