GIBCO10082-147北美血源(熱滅活)*
熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。 GIBCO10082-147北美血源(熱滅活)* 問:我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影響轉(zhuǎn)染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染,正確嗎?細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時,目的是什么? 答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結(jié)合過程的干擾,一般是2-6小時,根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活!這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
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