賽默飛細(xì)胞計數(shù)儀(Thermo Fisher Cell Counter)是一種用于快速準(zhǔn)確地計數(shù)細(xì)胞的實驗室儀器。以下是其基本使用說明:
準(zhǔn)備工作
儀器準(zhǔn)備:
確保細(xì)胞計數(shù)儀已連接電源并打開。
讓儀器預(yù)熱并校準(zhǔn)(如果需要)。
樣本準(zhǔn)備:
將細(xì)胞懸浮在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或緩沖液中。
調(diào)整細(xì)胞濃度,使其在推薦的范圍內(nèi)(一般為10^4到10^6 cells/mL)。
步驟一:裝載樣本
準(zhǔn)備計數(shù)板:
使用一次性計數(shù)板(Thermo Fisher Cell Counting Chamber Slide)。
確保計數(shù)板干凈無污染。
加樣本:
使用移液器取10 µL細(xì)胞懸液,加入計數(shù)板的一個孔中。
如果需要進(jìn)行細(xì)胞活力分析,可以將臺盼藍(lán)(Trypan Blue)染料與細(xì)胞懸液按1:1混合,然后加入計數(shù)板。
步驟二:操作儀器
插入計數(shù)板:
將裝有樣本的計數(shù)板插入細(xì)胞計數(shù)儀的樣品槽中,確保插入到位。
設(shè)置參數(shù):
在儀器的觸摸屏上設(shè)置相關(guān)參數(shù),如細(xì)胞類型、稀釋倍數(shù)、染料類型等。
開始計數(shù):
按下“Count"按鈕開始計數(shù)。
儀器將自動拍攝樣本圖像并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和分析。
步驟三:查看和保存結(jié)果
查看結(jié)果:
通過儀器顯示屏查看細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)(如使用染料)以及細(xì)胞濃度等數(shù)據(jù)。
儀器還會顯示細(xì)胞圖像,便于用戶進(jìn)行目視檢查。
保存和導(dǎo)出數(shù)據(jù):
將數(shù)據(jù)保存在儀器內(nèi)存中或?qū)С龅経SB存儲設(shè)備。
數(shù)據(jù)可導(dǎo)出為CSV或PDF格式,便于后續(xù)分析和報告生成。
步驟四:清潔和維護(hù)
取出計數(shù)板:
從樣品槽中取出計數(shù)板,按照實驗室生物安全規(guī)定處理廢棄計數(shù)板。
清潔儀器:
使用適當(dāng)?shù)那鍧崉┖蜔o絨布擦拭儀器的外部和樣品槽,保持儀器清潔。
定期維護(hù):
定期檢查和校準(zhǔn)儀器,確保其保持良好的工作狀態(tài)。
小提示
避免氣泡:在將樣本加到計數(shù)板時,避免產(chǎn)生氣泡,以免影響計數(shù)結(jié)果。
均勻混合:確保細(xì)胞懸液均勻混合,防止細(xì)胞沉淀導(dǎo)致計數(shù)不準(zhǔn)確。
使用標(biāo)準(zhǔn)染料:如需進(jìn)行活力分析,使用臺盼藍(lán)染料,并遵循操作規(guī)范。
常見問題解決
計數(shù)結(jié)果不穩(wěn)定:
確保細(xì)胞懸液均勻混合。
檢查計數(shù)板是否干凈,是否有氣泡。
數(shù)據(jù)導(dǎo)出問題:
確保USB設(shè)備已正確連接。
檢查儀器軟件是否需要更新。
圖像不清晰:
清潔計數(shù)板和鏡頭。
調(diào)整光源和對焦設(shè)置。
通過上述步驟和注意事項,您可以有效地使用賽默飛細(xì)胞計數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和分析,提高實驗效率和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。如果在使用過程中遇到問題,可以參考儀器的用戶手冊或聯(lián)系賽默飛技術(shù)支持。