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新型二代羊水培養(yǎng)基的檢驗方法
發(fā)布日期:
2020-08-27
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新型二代羊水培養(yǎng)基的檢驗方法:
采用如下方法做羊水細胞原位培養(yǎng)或按其它常規(guī)羊水細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)羊水細胞:
1、取羊水20ml, 以120xg離心十分鐘。
2、在無菌操作臺操作,棄上清液。
3、加入2ml羊水培養(yǎng)基,輕輕 混勻,制成細胞懸液。
4、取35mm培養(yǎng)皿,在蓋子上面及下半部側壁都做好標記(包括編號、姓名、日期等)。
5、滴加0.5ml細胞懸液至培養(yǎng)皿中的蓋玻片(25px2)中央,用移液管尖小心攤開。注意液體不能流出蓋玻片。
6、將培養(yǎng)皿置于5% CO2、濕度飽和的37度培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
7、24小時后,給每塊蓋玻片補加1.5ml培養(yǎng)基。
8、接種7天后觀察細胞。當發(fā)現蓋玻片上細胞克隆數大于10個,每個克隆細胞數大于300且克隆邊沿細胞呈旺盛分裂狀態(tài)時,即可收獲細胞。否則,繼續(xù)培養(yǎng)1~2天。當克隆邊沿細胞融合度大于90%,呈現停止分裂狀態(tài)時,意味細胞已經老化,不適合用作分析。
9、適合收獲的細胞按常規(guī)方法使細胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細胞片,經吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。
17758005454
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