南美胎牛血清使用方法: 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,常使用的胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清濃度。
南美胎牛血清作用:
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7.內(nèi)毒素極低,其次無(wú)菌過(guò)濾,三次為0.1um無(wú)菌過(guò)濾處理。
8.進(jìn)行細(xì)菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測(cè),符合動(dòng)物協(xié)會(huì)要求
9.建議使用范圍:科研使用,細(xì)胞培養(yǎng)
10.儲(chǔ)存:-20℃凍存,避免反復(fù)凍融,4°C保存不超過(guò)1個(gè)月。反復(fù)凍融會(huì)破壞血清中有效成 分,影響血清品質(zhì)
南美胎牛血清適用于以下用途
**培養(yǎng)基添加
*常規(guī)類型細(xì)胞培養(yǎng)適用
*診斷試劑的穩(wěn)定
*材料表面封閉
*胰蛋白酶滅活
儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購(gòu)買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長(zhǎng)時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。
南美胎牛血清使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系,迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。